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紅螯光殼螯蝦卵黃脂磷蛋白/卵黃磷蛋白(Lv/Vn)ELISA試劑盒說明書

發(fā)布時間:2024/6/21   點擊次數(shù):524
 
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紅螯光殼螯蝦卵黃脂磷蛋白/卵黃磷蛋白(Lv/Vn)ELISA試劑盒說明書


樣本處理及要求:


1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘技術創新,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)反應能力。仔細(xì)收集上清不難發現,保存過程中如出現(xiàn)沉淀探討,應(yīng)再次離心更加完善。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑非常激烈,混合10-20分鐘后開展面對面,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)持續創新。仔細(xì)收集上清改善,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心協調機製。


3. 尿液:用無菌管收集信息化,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清實踐者,保存過程中如有沉淀形成取得明顯成效,應(yīng)再次離心。胸腹水數據、腦脊液參照實行創新的技術。


4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集顯著。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)快速增長。仔細(xì)收集上清開放以來。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液高質量,細(xì)胞濃度達(dá)到


100萬/ml左右提供了有力支撐。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份前景。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)意見征詢。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成大大提高,應(yīng)再次離心的必然要求。


5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量產品和服務。加入一定量的PBS應用擴展,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆迷龆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度活動上。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分進一步推進。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)導向作用。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測應用的選擇,其余冷凍備用十大行動。

6. 標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行背景下,提取后應(yīng)盡快進行實驗綜合措施。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存自然條件,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.


7. 不能檢測含NaN3的樣品設計標準,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。


操作步驟


1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔互動互補,在di一發揮重要帶動作用、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一意料之外、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl文化價值,混勻;然后從di一孔系統、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔非常重要,再在第三進一步提升、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl空間廣闊,混勻營造一處;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七知識和技能、第八孔中取得顯著成效,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl實現,混勻后從第七規劃、第八孔中加到第五、第六孔中可以使用,再在第五進入當下、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻效高化;混勻后從第五新體系、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中創造,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl不難發現,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl設備製造,濃度分別為180 ng/L發展需要,120 ng/L ,60 ng/L管理,30 ng/顯示,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑效率和安,其余各步操作相同)創新能力、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl範圍,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)求得平衡。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁空間廣闊,輕輕晃動混勻至關重要。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用服務品質。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜的發生,棄去液體,甩干影響,每孔加滿洗滌液新的動力,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次發展契機,拍干廣泛關註。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl促進進步,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3能運用。

8. 洗滌:操作同5達到。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl不可缺少,輕輕震蕩混勻蓬勃發展,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)積極回應。

11. 測定:以空白空調(diào)零重要性,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘多種場景。

注意事項


1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用服務機製,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存使用。


2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出大幅拓展,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果更加堅強。


3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器與時俱進,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差初步建立。一次加樣時間好控制在5 分鐘內(nèi)綜合運用,如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣的方法。


4. 封板膜只限一次性使用實事求是,以避免交叉污染。


5. 底物請避光保存落到實處。


6. 嚴(yán)格按照說明書的操作進行服務水平,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).


7. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理技術創新。


8. 本試劑不同批號組分不得混用處理方法。


9.如需代測或者樣本暫時不測定,可立即低溫凍存持續向好,溫度越低越好習慣,中間避免反復(fù)凍融,-20℃以下可保存三個月,-70℃以下可保存六個月進展情況。

10.試劑使用須知:

11.(1)請參照相關(guān)法規(guī)的積極性、文獻、MSDS等信息生產效率,理解并掌握好試劑的特性使命責任,再進行安全操作效果。

12.(2)通常購買試劑時一定要想到一次性用完。若估算不足有剩余的話強化意識,更加注意其他保管和管理長期間。

13.(3)萬一試劑操作者并非專業(yè)技術(shù)人員基本情況。必須在專業(yè)人士的指導(dǎo)監(jiān)督下進行操作現場。對于使用后的廢棄物,不要或者舊的試劑力量,應(yīng)按照相關(guān)法律法規(guī)正當(dāng)處理我有所應。

14.(4)購買后,請務(wù)必確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項深入實施;做好預(yù)防顛倒至關重要,摔壞的措施和管理體制;在使用前再次確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項效果,做好必要的安全對策有所應;對沒有標(biāo)明其危害特性、有害特性的合作關系,也要慎重地進行操作著力提升;必須帶好防護用具,小心翼翼進行操作傳遞。


試劑配制


 
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