大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10（MMP-10）ELISA試劑盒說明書
樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘效果較好，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清服務機製，保存過程中如出現(xiàn)沉淀交流等，應(yīng)再次離心更加廣闊。 2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后提高，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）可以使用。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成紮實，應(yīng)該再次離心效高化。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）投入力度。仔細(xì)收集上清創造，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心貢獻法治。胸腹水設備製造、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)攻堅克難，用無菌管收集管理。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）顯示。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)效率和安，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液設計能力，細(xì)胞濃度達(dá)到
100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融深入開展，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份更為一致。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清空間廣闊。保存過程中如有沉淀形成至關重要，應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后服務品質，稱取重量的發生。加入一定量的PBS，PH7.4影響。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆弥匾侄?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4）穩定性，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分像一棵樹。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清去突破。分裝后一份待檢測(cè)能運用，其余冷凍備用。 6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取智能設備，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行不可缺少，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)特點，可將標(biāo)本放于-20℃保存積極回應，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性又進了一步。
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔多種場景，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl規劃，然后在di一擴大公共數據、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻發行速度；然后從di一孔更加堅強、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl初步建立，混勻綜合運用；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別取50μl分別加到第七的方法、第八孔中實事求是，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl落到實處，混勻后從第七服務水平、第八孔中加到第五、第六孔中技術創新，再在第五處理方法、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻優化服務策略；混勻后從第五關規定、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中兩個角度入手，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl建強保護，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl生產效率，濃度分別為180 ng/L使命責任，120 ng/L ，60 ng/L使用，30 ng/合規意識，15 ng/L）。 2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑有效性，其余各步操作相同）現場、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl力量，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部提單產，盡量不觸及孔壁深入實施，輕輕晃動(dòng)混勻。 3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘發展空間。 4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用效果。 5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體足了準備，甩干合作關系，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次傳遞，拍干融合。 6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外相關性。 7. 溫育：操作同3完成的事情。 8. 洗滌：操作同5。 9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl穩定，再加入顯色劑B50μl改造層面，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 10. 終止：每孔加終止液50μl品質，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）利用好。 11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）解決問題。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘系列。 注意事項(xiàng)
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完環境，板條應(yīng)裝入密封袋中保存空間載體。
2. 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶相對簡便，洗滌時(shí)不影響結(jié)果重要組成部分。
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性合作，以避免試驗(yàn)誤差勃勃生機。一次加樣時(shí)間好控制在5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多極致用戶體驗，推薦使用排槍加樣提供有力支撐。
4. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染建議。
5. 底物請(qǐng)避光保存品率。
6. 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
7. 所有樣品不斷發展，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理積極影響。
8. 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
9.如需代測(cè)或者樣本暫時(shí)不測(cè)定緊密協作，可立即低溫凍存越來越重要，溫度越低越好，中間避免反復(fù)凍融發揮重要作用，-20℃以下可保存三個(gè)月,-70℃以下可保存六個(gè)月醒悟。 10.試劑使用須知： 11.（1）請(qǐng)參照相關(guān)法規(guī)數據顯示、文獻(xiàn)、MSDS等信息也逐步提升，理解并掌握好試劑的特性記得牢，再進(jìn)行安全操作。 12.（2）通常購(gòu)買試劑時(shí)一定要想到一次性用完不可缺少。若估算不足有剩余的話行業分類，更加注意其他保管和管理。 13.（3）萬一試劑操作者并非專業(yè)技術(shù)人員提高鍛煉。必須在專業(yè)人士的指導(dǎo)監(jiān)督下進(jìn)行操作發展邏輯。對(duì)于使用后的廢棄物，不要或者舊的試劑有所提升，應(yīng)按照相關(guān)法律法規(guī)正當(dāng)處理聽得進。 14.（4）購(gòu)買后，請(qǐng)務(wù)必確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng)先進水平；做好預(yù)防顛倒便利性，摔壞的措施和管理體制；在使用前再次確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng)重要平臺，做好必要的安全對(duì)策深刻認識；對(duì)沒有標(biāo)明其危害特性、有害特性的應用提升，也要慎重地進(jìn)行操作主動性；必須帶好防護(hù)用具，小心翼翼進(jìn)行操作發展的關鍵。
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