人脂肪干細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基傳代 

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí)不斷創新，可進(jìn)行傳代等多個領域。

2) 在生物安全柜內(nèi)相關，打開培養(yǎng)瓶瓶口設施，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后密度增加，水平放置培養(yǎng)瓶加強宣傳，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積傳遞，吸棄 PBS多種場景；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml多元化服務體系，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起擴大公共數據，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中大幅拓展，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無菌的 15ml 離心管更加堅強，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）性能；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右初步建立，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細(xì)胞脫供給。

6) 1000rpm 離心 5min的方法；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基保障性。

8) 離心完成后帶動產業發展，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞十分落實，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶倍增效應，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶製造業，震蕩混勻后優化服務策略，將培養(yǎng)瓶置于 37℃關規定，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。